PRUEBA DE LA CATALASA
La catalasa es un enzima que se encuentra en la mayoría de los microorganismos aerobios y anaerobios facultativos que contienen citocromo .
El peróxido de hidrógeno es un producto final de la degradación aeróbica oxidativa de los hidratos de carbono.
La catalasa actúa sobre el peróxido de hidrógeno descomponiéndose en agua y oxígeno gas. Si se acumulase el peróxido de hidrógeno en los microorganismos éstos morirían; por ello es fundamental la presencia de catalasa en los microorganismos.
Objetivo:
Comprobar la presencia de la enzima catalasa.
Fundamento:
Se pondrá en contacto el microorganismo problema con el peróxido de hidrógeno. Si el microorganismo tiene el enzima catalasa se formará oxígeno en estado gaseoso al reducir el peróxido de hidrógeno.
Material:
- Portaobjetos
- Pipeta Pasteur
- Asa de siembra
- Mechero
Reactivos:
- Peróxido de hidrógeno
- Microorganismo
Procedimiento:
- Con un asa se toma una colonia del microorganismo de 12-24h (la colonia no se debe coger de un Agar Sangre, ya que, los hematíes contienen catalasa y se podría dar resultados erróneos.
- Se coloca la colonia de microorganismo en un portaobjetos
- Encima del microorganismo se añade una gota de peróxido de hidrógeno
- Comprobar los resultados debido a la formación de burbujas (resultado positivo)
Interpretación de los resultados:
- Catalasa +: formación de burbujas de oxígeno inmediatamente
- Catalasa -: No aparecen burbujas
En esta imagen apreciamos como los dos microorganismo A (S. Aureus) y E (S.Epidermidis), tienen catalasa +. En los dos portaobjetos se producen burbujas, eso es debido a la enzima catalasa que contienen las dos bacterias.
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